（一）光學(xué)顯微鏡的成像原理 
顯微鏡的放大是通過透鏡來完成的，單透鏡成像具有像差，影響像質(zhì)。由單透鏡組合而成的透鏡組相當(dāng)于一個(gè)凸透鏡，放大作用更好。

（二）顯微鏡的性能 
顯微鏡分辨能力的高低決定于光學(xué)系統(tǒng)的各種條件。被觀察的物體必須放大率高，而且清晰，物體放大后，能否呈現(xiàn)清晰的細(xì)微結(jié)構(gòu)，首先取決于物鏡的性能，其次為目鏡和聚光鏡的性能。 

1、數(shù)值孔徑 也叫做鏡口率（或開口率），簡寫為N.A，在物鏡和聚光器上都標(biāo)有它們的數(shù)值孔徑，數(shù)值孔徑是物鏡和聚光器的主要參數(shù)，也是判斷它們性能的zui重要指標(biāo)。數(shù)值孔徑和顯微鏡的各種性能有密切的關(guān)系，它與顯微鏡的分辨力成正比，與焦深成反比，與鏡象亮度的平方根成正比。 
數(shù)值孔徑可用下式表示： 

式中： 
n—物鏡與標(biāo)本之間的介質(zhì)析射率 
α—物鏡的鏡口角 

所謂鏡口角是指從物鏡光軸上的物點(diǎn)發(fā)出的光線與物鏡前透鏡有效直徑的邊緣所張的角度，見圖1—5。 
鏡口角α總是小于180°。因?yàn)榭諝獾恼凵渎蕿?，所以干燥物鏡的數(shù)值孔徑總是小于1，一般為0.05—0.95；油浸物鏡如用香柏油（折射率為1.515）浸沒，則數(shù)值孔徑zui大可接近1.5。雖然理論上數(shù)值孔徑的極限等于所用浸沒介質(zhì)的折射率，但實(shí)際上從透鏡的制造技術(shù)看，是不可能達(dá)到這一極限的。通常在實(shí)用范圍內(nèi)，油浸物鏡的zui大數(shù)值孔徑是1.4。 

幾種物質(zhì)的介質(zhì)的折射率如下： 
空氣為1.0，水為1.33，玻璃為1.5，甘油為1.47，香柏油為1.52。 
介質(zhì)折射率對(duì)物鏡光線通路的影響見圖1—6。 

2、分辨力 
D可用下式表示： 
D=λ/2N.A. 
可見光的波長為0.4—0.7微米，平均波長為0.55微米。若用數(shù)值孔為0.65的物鏡，則D=0.55微米/2×0.65=0.42微米。這表示被檢物體在0.42微米以上時(shí)可被觀察到，若小于0.42微米就不能視見。如果使用數(shù)值孔徑為1.25的物鏡，則D=2.20微米。凡被檢物體長度大于這個(gè)數(shù)值，均能視見。由此可見，D值愈小，分辨力愈高，物象愈清楚。根據(jù)上式，可通過：（1）減低波長；（2）增大折射率；（3）加大鏡口角來提高分辨力。紫外線作光源的顯微鏡和電子顯微鏡就是利用短光波來提高分辨力以檢視較小的物體的。物鏡分辨力的高低與造象是否清楚有密切的關(guān)系。目鏡沒有這種性能。目鏡只放大物鏡所造的象。 

3、放大率： 
顯微鏡放大物體，首先經(jīng)過物鏡*次放大造象，目鏡在明視距離造成第二次放大象。放大率就是zui后的象 和原物體兩者體積大小之比例。因此，顯微鏡的放大率（V）等于物鏡放大率（V1）和目鏡放大率（V2）的乘積，即： 
V=V1×V2 
比較的計(jì)算方法，可從下列公式求得 

F1=接物鏡焦距，F(xiàn)2=接目鏡焦距  △=光學(xué)筒長，D=明視距離（=250毫米）

設(shè)△=160毫米   F1=4毫米  D=250毫米  F2=150毫米

4、焦深： 
在顯微鏡下觀察一個(gè)標(biāo)本時(shí)，焦點(diǎn)對(duì)在某一象面時(shí)，物象zui清晰，這象面為目的面。在視野內(nèi)除目的面外，還能在目的面的上面和下面看見模糊的物象，這兩個(gè)面之間的距離稱為焦深。物鏡的焦深和數(shù)值孔徑及放大率成反比：即數(shù)值孔徑和放大率愈大，焦深愈小。因此調(diào)節(jié)油鏡比調(diào)節(jié)低倍鏡要更加仔細(xì)，否則容易使物象滑過而找不到。